Práctica 40: Determinación del fibrinógeno

DETERMINACIÓN DEL FIBRINÓGENO

Fundamento:

El fribrinógeno en presencia de trombona se transforma en fibrina. El tiempo de formación del coágulo es proporcional a la concentración de Fibrinógemo presente en la muestra de plasma.
La determinación del fibrinógeno por el tiempo de coagulación de trombina, se basa en el método de Clauss. En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo en el plasma diluido es proporcional a la concentración de fibrinógeno.

Material:

• 6 tubos de ensayo de plástico
• Pipeta de 100 y 200 ul 
• Pipet graduada de 5 ml
• 6 cubetas de coagulómetro
• coagulómetro 

Reactivos:

• Trombina bovina ( R1)
• Tampón Imidazol (R2)
• Solución de Caolín (R3)
• Coagulation cal 

Muestra:

• Plasma pobre en plaquetas (PPP)

Procedimiento:

1. Rotulamos los 5 tubos con 1/40,1/30,1/20,1/10,1/5 y un tubo que contenga 50ul de muestra + 450 ul de tampón Imizadol.
2. Echamos en cada tubo las cantidades de la siguiente tabla:

                     

1/40    1/30    1/20.   1/10.    1/5

Tampón Imizadol (ml)                                    3.9     2.9       1.9     0.9      0.4

Coagulation cal (ml)                                      0.1      0.1       0.1     0.1      0.1

     3. Cogemos 5 cubetas y los rotulamos con 1/40, 1/30, 1/20, 1/10, 1/5
     4. Echamos 200 ul de los tubos anteriores y añadimos 20 ul de R3 (caolin)
     5. Lo ponemos debajo de la celda de medida y echamos 100 ul de R1 (trombina bovina)

Resultados:

Concentración (mg/dl)	Tiempo (seg)
478	11.7
239	15.6
119.5	21.7
78.87	45.2
59.75	46.9

          

Hoja de trabajo 

1º. ¿ De qué tipo es la determinación de fibrinógeno realizada en esta práctica?

- Plasmático

2º. ¿ A qué concentración está la trombina bovina?

- 100 u NIH/ml

3º. ¿A qué dilución se somete a la muestra?

- 1/10

4º. ¿ Cuál es la fibrinoogenemia normal?

- entre 150 y 450 mg/dl