Práctica 39: Preparación de una curva de actividad de la protrombina

PREPARACIÓN DE UNA CURVA DE ACTIVIDAD DE LA PROTROMBINA

Fundamento:

Para construir un curva de actividad de la protrombina se perpara una batería de diluciones a partir sw un plasma control normal, y se mide el TP del plasma control normal no diluido y de cada una de las diluciones preparadas.
Se asigna el 100% de actividad al número de segundos medidos en la determinación del TP del plasma normal puro, y se calcula el porcentaje que les corresponde a los valores de TP determinados en cada una de las disoluciones de éste.

Material:

• 5 tubos de plástico
• Pipeta de 100 y 200 ul
• 5 cubetas de coagulómetro
• coagulómetro
• gradilla 
• Pipeta de 1 ml

Reactivos:

• Tromboplastina cálcica
• Solución salina
• Pool deplasma

Muestra:

• Plasma pobre en plaquetas (PPP)

Procedimiento:

1. Rotulamos 5 tubos con 100, 50, 33,25, 10
2. Echamos las cantidades que nos indica la tabla:

	100	50	33	25	10
pool de plasma	200	200	200	200	200
Solución salina	0	200	400	600	1.800

    3. Cogemos 5 cubetas y las rotulamos con 100, 50, 33, 25, 10 y echamos 100 ul de cada tubo anterior y atemperamos 5 min. en el coagulómetro.

     4. Vamos poniendo las cubetas debajo de la celda de medida y añadimos 100 ul de tromboplastina cálcica.

      5. Anotamos los resultados.

Resultados:

• Plasma 100% diluido: 12,3
• Plasma 50%: 19
• Plasma 33%: 25,3
• Plasma 25%: 32,4
• Plasma 10%: 61,3

Hoja de trabajo

1º. ¿Con qué se diluye el pool  de plasma normal o el pool control normal?

- Con solución salina.

2º. ¿ Qué porcentaje de actividad se asigna a la dilución del plasma control de 1/2?

- 50%

3º. ¿ Cuándo se pone en marcha la lectura del coagulómetro?

- Cuando echamos la tromboplastina cálcica.

4º. ¿ Qué se anota en el eje de ordenadas?

- El % de actividad.