Práctica 28: Cálculo de los índices eritrocitarios

Cálculo de los índices eritrocitarios (RBC,HTO Y Hb)

Materiales.

Recuento RBC.

• Una pipeta de Thoma para glóbulos rojos.
• Un tubo de goma con boquilla.
• Una cámara de recuento.
• Un cubre.
• Un microscopio.
• Papel de filtro
• Tubo de ensayo.
• Gradilla.

HTO.

• Dos tubos capilares.
• Plastilina.
• Gasa.
• Una centrífuga de microhematocrito.
• Una regla milimetrada o un lector de microhematocrito.

Hb.

• 4 tubos de ensayo
• Gradilla.
• Micropipeta.
• Vaso de precipitado.
• pipeta de 5 ml o pipeta pasteur.
• Espectrofotómetro.

Reactivos.

Recuento RBC.

Líquido de dilución. El que vamos a utilizar, que es el más 

utilizado, es el de Hayem.

El líquido de Hayem se compone de:

• 2,5 g de sulfato sódico.
• 0,5 g de cloruro sódico.
• 0,25 g de cloruro mercurio.
• 100 ml de agua  destilada.

Para la limpieza de la pipeta de Thoma necesitaremos.

• Agua corriente.
• Agua destilada.
• Alcohol.

HTO.

• Ningunno

HB

• Hemoglobin 50x.

Ferrianuro de potasio 0,60 mmol/L

Cianuro de potasio  77 mmol/L

Dihidrógeno de fosfato sódico

Muestra:

• Sangre venosa

Procedimiento:

La primera práctica:

1. Llenamos de sangre un tubo de ensayo
2. Llenamos dos capilares 
3. Lo centrifugamos a 12000rpm durante 5 min.
4. Calculamos el porcentaje con una regla o un lector

La segunda práctica:

1. Cogemos la pipeta de Thoma y absorvemos la sangre hasta 1.
2. Después, lo introducimos en el otro tubo de ensayo y lo llenamos hasta la línea que tiene.
3. Quitamos el tubo de goma con cuidado y mezclamos suavemente.
4. Desechamos las tres gotas primeras
5. Cogemos el cubre y lo ponemos en el centro de la cámara humedeciendo los laterales con una gota de agua
6. Ponemos una gota entre la cámara y el cubre
7. Ponerlo en el microscopio con el aumento de 40 x y contar los hematíes que hay en 80 cuadrados pequeños del cuadro central.

La tercera práctica:

1. Cogemos 4 tubos de ensayo
2. Los rotulamos con blanco , patron, muestra 1 y muestra 2
3. Añadimos en los 4 tubos, 2.5 ml de reactivo de trabajo
4. Añadir 10 ul de calibrador en el tubo patron
5. Añadir 10 ul de muestra en el tubo muestra 1 y muestra 2
6. Dejar 3 min
7. Ir al espectofotómetro

Resultados:

HTO :

Primer capilar: 45%

Segundo capilar: 49%

RBC :

Primer recuento: 4400000 millones/ mm3

Segundo recuento: 3815000 millones/mm3

[Hb] :

Muestra 1 = 1,061

Muestra 2 =1,344