Práctica 26: Recuento de plaquetas con hemocitómetro

 Recuento de plaquetas con hemocitómetro

Fundamento:

Para el recuento en cámara de plaquetas, se diluye la sangre problema en un líquido y posteriormente se deposita la cámara de recuento donde se cuentan las células presentes en alguno de los cuadrados.

Material:

• Pipeta diluidora de Thoma de glóbulos rojos
• tubo de goma con boquilla
• Cámara de recuento
• Cubreobjetos
• Microscopio
• Placa de petri
• Papel de filtro

Muestra:

• Sangre capilar o venosa

Reactivos:

• Agua destilada
• Spinreact

Procedimiento:

1. Cogemos la pipeta de Thoma y la llenamos hasta 1
2. Lo metemos en el líquido de spinreact y aspiramos hasta 101
3. Quitamos el tubo de goma y agitamos durante 5 min.
4. Desechamos las 5 primeras gotas y después ponemos la sexta entre el cubre y la cámara.
5. En la placa de Petri, introducimos un papel de filtro mojado y a continuación metemos la cámara y la dejamos 15 min.
6. Observamos con el objetivo de 10x y luego con el de 40x 
7. Contamos cuantas hay en el cuadrado central.

Resultados:

PLT/mm3 = P x V x D = P x 1000

• PLT : número de plaquetas
• P: número de plaquetas contadas en el cuadrado central
• V: corrección de volumen
• D: corrección de dilución

Hoja de trabajo

1º. ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?

- La pipeta de Thoma

2º.¿Qué funciones desempeña el liquido de dilucion              empleado?

-Rompen los hematíes 

-Evita la agregación de las plaquetas entre si 

-Facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refrigerantes

3.¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un 

ensayo?

-1 ml aproximadamente

4.¿Con qué se puede preparar una cámara húmeda?

- Con una placa de petri cerrada, en cuyo interior se deposita un papel de filtro con agua

5.¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas?

-40x

6.¿Cómo se aprecian los trombocitos en este recuento?

-Se aprecian como corpúsculos redondeados u ovalados de tamaño muy pequeño 

Resultados obtenidos

• Número de plaquetas contadas en un cuadrado grande: 740 
• Número de plaquetas por mm3 de sangre: 740.000.000 plaquetas/mm3