domingo, 4 de enero de 2015

Práctica 20: Recuento de hematíes

RECUENTO DE HEMATÍES


Material:
  • Pipeta diluidora de Thoma
  • Tubo de goma con boquilla 
  • Cámara de recuento
  • Un cubreobjetos
  • Un microscopio
  • Agua destilada
  • 2 Tubos de ensayo

Reactivos:
  • Líquido de dilución Hayem que está compuesto por:
        - 2,5g de sulfato sódico
        - 0,5g de cloruro sódico
        - 0,25g de cloruro mercúrico
        - 100ml de agua destilada

Muestra:
  • Sangre venosa anticoagulada o sangre capilar

Fundamento:
Para el recuento de hematíes, la sangre se diluye en un líquido y posteriormente se pone en la cámara de recuento donde se cuentan las células que hay.

Desarrollo:
    1. Cogemos la pipeta de Thoma y absorvemos la sangre hasta 1.
    2. Después, lo introducimos en el otro tubo de ensayo y lo llenamos hasta la línea que tiene.
    3. Quitamos el tubo de goma con cuidado y mezclamos suavemente.
    4. Desechamos las tres gotas primeras
    5. Cogemos el cubre y lo ponemos en el centro de la cámara humedeciendo los laterales con una gota de agua
    6. Ponemos una gota entre la cámara y el cubre
    7. Ponerlo en el microscopio con el aumento de 40 x y contar los hematíes que hay en 80 cuadrados pequeños del cuadro central.
Resultado:

Hoja de trabajo


1º. ¿ Qué se debe hacer si el líquido de Hayem contiene precipitados?

- Hay que filtrarlo

2º. ¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrospequeños donde se han contado los hematíes?

V=0.0625·0,0625·0,1=0,000390625 mm cúbicos.

3º. ¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados medianos donde se han contado los hematíes?

- V=0,25·0,25·0,1=0,0625mm cúbicos.

4º. ¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadrado central?

- V=1·1·0,1=0,1mm cúbicos.

5º. Si la pipeta Thoma se enrasa con sangre hasta la señal de 1, ¿cuál es la dilución posteriormente obtenida?

1:100

6º. Si la sangre se siluye a 1/200 y se cuentan 450 hematíes en 5 cuadrados medianos, ¿ cuál es la RBC obtenido?

RBC= 450·5·10·200=45000000


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